1、試劑盒的運(yùn)輸
生化試劑盒一般采用冰袋運(yùn)輸；運(yùn)輸中冰袋已融化并不會影響其質(zhì)量，請放心使用。
2、試劑盒的保存
收到后，請在預(yù)實(shí)驗(yàn)前及時確認(rèn)各組分量是否與說明書標(biāo)注的一致，若有疑問請及時與我們技術(shù)聯(lián)系（聯(lián)系方式見說明書右下方），拆開包裝 后，請按照每個試劑的保存溫度保存。
3、試劑盒有效期
試劑盒大標(biāo)簽上顯示試劑盒有效期，一般是3個月或6個月（具體以大標(biāo)簽為準(zhǔn)）。粉體試劑加溶液后的保存周期，可參照說明書中“備注”一欄的說明（也可聯(lián)系說明書下方的技術(shù)支持咨詢確認(rèn)）。
4、預(yù)實(shí)驗(yàn)五步法
強(qiáng)烈建議客戶選取2-3個預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)測定。
目的：了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！
第一步：將試劑盒內(nèi)的紙質(zhì)版說明書通讀一遍，核查試劑數(shù)量、狀態(tài)（粉體、液體）及各組份的量與說明書是否一致，若無異常則按照規(guī)定溫度存放。
第二步：臨用前取出試劑，溶解或者恢復(fù)至室溫，以待使用。
第三步：選擇差異大的2-3個樣本進(jìn)行研磨提取，取上清液備用。
第四步：根據(jù)說明書操作步驟進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。
第五步：待預(yù)實(shí)驗(yàn)確定好樣本檢測濃度、調(diào)整情況后，再批量進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。
5、分光法（F）與微板法（W）的區(qū)別
F:指分光法；W：指微板法;
分光法是指使用紫外可見分光光度計或可見分光光度計檢測，分光法試劑盒(貨號中帶“F”)，需要使用石英或玻璃比色皿；其規(guī)格是：光徑：1cm,容積：1mL, 狹縫寬：3mm
微板法指使用全波段連續(xù)酶標(biāo)儀檢測。微板法試劑盒（貨號中帶“W”），需要使用96孔酶標(biāo)板或UV板，其規(guī)格是：U型底或平底、最大孔容量 300μL
6、普通酶標(biāo)板與UV板的區(qū)別？
使用酶標(biāo)儀檢測時，如果波長大于等于340nm,使用普通的96孔板；但是波長小于340nm時，需要使用UV板（紫外酶標(biāo)板）；UV板（PS聚苯乙稀石英底）價格比較貴，但是可以清洗，重復(fù)使用。一般建議重復(fù)使用3-5次；
7、分光法與微板法試劑盒能混用嗎？
不可以。兩者原理幾乎一樣，但因反應(yīng)體系、樣本用量、試劑濃度、儀器和耗材都不同，并且混用后結(jié)果的準(zhǔn)確性不能保證，不建議混用與任意改變體系。
8、市面上見到的50T/48S；100T/96S;120T/100S是什么意思？
T:指測試（Test）次數(shù)；在實(shí)驗(yàn)室中，這通常指的是反應(yīng)孔；每個反應(yīng)孔可以是一個實(shí)驗(yàn)樣本，或者對照；并不代表測的樣本個數(shù)。50T是50個反應(yīng)孔，不一定代表測50個樣本；
S：指可以測試的樣本（Sample）個數(shù)；48樣、96樣：指可以檢測48個樣本、96個樣本（不含重復(fù)）即得到48個、96個數(shù)據(jù)結(jié)果
9、官網(wǎng)上試劑盒規(guī)格標(biāo)注的“48樣”、“96樣”是什么意思呢？
“48樣”、“96樣”是試劑盒規(guī)格，我們定義了試劑盒可以測多少樣，對于試劑盒需要的試劑量都給足的；一般會給到超出需用量的10-20%
48樣、96樣：指可以檢測48個樣本、96個樣本（不含重復(fù)）即得到48個、96個最終的數(shù)據(jù)結(jié)果。格銳思生物的試劑盒48樣可以測不少于50個樣本；96樣指可以測定不少于100個樣本。
10、標(biāo)準(zhǔn)曲線是否需要重新做？
一般不建議重新做標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制會損耗試劑量，不夠測到試劑盒規(guī)格的樣本數(shù)量，另外我們的標(biāo)準(zhǔn)曲線是可以溯源，保證標(biāo)曲的客觀、真實(shí)、科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，可以直接使用。
a、格銳思針對需要標(biāo)曲曲線的指標(biāo)，給了標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，同時給了標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，以證實(shí)我們的標(biāo)曲是客觀做出來的，不是理論推導(dǎo)的。
b、格銳思同時給了標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的實(shí)驗(yàn)的步驟，客戶對標(biāo)曲有疑問的話，可以按照我們步驟，重新做標(biāo)曲。
c、格銳思根據(jù)標(biāo)曲推導(dǎo)出最終的計算公式，客戶只需要測出吸光值差值與樣本重量就可以帶入計算。
11、什么是冰浴勻漿？
（1）使用研缽勻漿：將研缽置于冰盒上勻漿即冰浴勻漿。稱取樣本置于研缽中，研缽和提取液提前預(yù)冷或?qū)⒀欣徶糜谒楸?、冰盒上，加入一半量的提取液研磨均勻，轉(zhuǎn)移至離心管中，再向研缽中加入另一半量的提取液涮洗研缽，轉(zhuǎn)移至同一離心管中合并；
（2）使用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿：先把研磨模塊提前放到-20℃預(yù)冷；然后將稱好的組織放入離心管中，加入適量預(yù)冷的提取液、鋼珠，按照勻漿機(jī)要求設(shè)定參數(shù)，進(jìn)行研磨，動物植物組織都可以，對于纖維含量高，難磨樣本可以提高赫茲和延長時間?；蛘叨啻畏磸?fù)研磨
（3）使用液氮研磨后勻漿：樣本液氮研磨成粉后，加入提取液再次按照（1）、（2）的方式研磨，或者放入超聲波清洗儀300W超聲5min，超聲全程溫度不得超過10℃。
12、樣本的保存
測常規(guī)指標(biāo)，樣本保存在-80℃下，一年以上都可以測；保存在-40℃下，半年之內(nèi)都可以測；保存在-20℃下，三個月都沒問題。
一、植物激素的研究意義
植物激素（Phytohormone）亦稱植物天然激素或植物內(nèi)源激素。是指植物體內(nèi)產(chǎn)生的一些微量而能調(diào)節(jié)（促進(jìn)、抑制）自身生理過程的有機(jī)化合物。已知植物體內(nèi)產(chǎn)生的激素有六大類，即生長素、赤霉素、細(xì)胞分裂素、脫落酸、乙烯和油菜素甾醇；最近新確認(rèn)的植物激素有多胺，水楊酸類，茉莉酸（酯）等等。
植物激素是植物感受外部環(huán)境變化，調(diào)節(jié)自身生長狀態(tài)、抵御不良環(huán)境及維持生存必不可少少的信號分子，對于調(diào)節(jié)植物的各種生長發(fā)育過程和環(huán)境的應(yīng)答具有十分重要的意義，并且不同植物激素直接存在一定的互助關(guān)系。
二、不同植物激素與研究方向的關(guān)系
結(jié)合我司給客戶代測的總結(jié)，我們總結(jié)出來以下幾個研究方向與關(guān)聯(lián)指標(biāo)：
?水楊酸、水楊酸甲酯、茉莉酸、茉莉酸甲酯：用于抗蟲、抗病等生物脅迫。
?水楊酸、脫落酸、乙烯前體（ACC）、赤霉素：用于抗旱、耐鹽、抗寒冷等非生物脅迫
?吲哚乙酸、脫落酸、細(xì)胞分裂素、赤霉素、油菜素內(nèi)脂：用于植物生長發(fā)育，包含分化、成熟衰老、凋亡等
?茉莉酸、赤霉素、脫落酸、生長素：用于種子萌發(fā)與休眠
三、植物激素檢測一般有哪些檢測方法呢
目前植物激素測試方法有三類：酶聯(lián)免疫法即ELISA法；高效液相色譜法（HPLC法）；液相與質(zhì)譜聯(lián)用方法（LC-MS/MS法）
Elisa法是最為簡便，檢測周期短，檢測單價更實(shí)惠，但是數(shù)據(jù)精度低于后兩種方法，但是其優(yōu)勢在于適合大田試驗(yàn)篩選，樣本數(shù)量很多，經(jīng)費(fèi)有限下，可以是實(shí)現(xiàn)快速、節(jié)約經(jīng)費(fèi)。但是目前高水平期刊對于測定激素采用ELISA法，認(rèn)可度越來越低。并且ELISA法對于檢測含量較高的激素比如IAA、ABA比較適合，其他含量低的激素檢測就受到限制。
HPLC法檢測靈敏度高于ELISA方法，它適合的激素指標(biāo)比較多，比如IAA,ABA、SA等，而對于GA、JA、BR等低含量的激素是不能精確檢測出來或者檢測不到。
LC-MS/MS 該方法充分結(jié)合了液相的分離能力與MS的強(qiáng)定性能力，檢測精確度可達(dá)Pg級別，定性與定量的精確度更好，數(shù)據(jù)精確度滿足目前國內(nèi)外期刊要求，適合對數(shù)據(jù)要求精確度高的客戶，并且基本現(xiàn)有激素都能檢測。
四、常見測試中的一些問題
1、植物激素的游離態(tài)與結(jié)合態(tài)之說？
有些植物激素并不是單一形態(tài)存在，常以兩種狀態(tài)存在與植物體內(nèi)，一種是游離態(tài)，一種是結(jié)合態(tài)，兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)上區(qū)別在于是否有共價鍵結(jié)合的小分子，帶小分子的為結(jié)合態(tài)，若無則為游離態(tài)。小分子結(jié)合不僅改變了激素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并且在多數(shù)情況下導(dǎo)致激素活性下降，以至完全失活。所以對于有兩種形態(tài)的激素，我們實(shí)際是測具有有生理活性狀態(tài)--游離態(tài)激素。
實(shí)際測試過程中，客戶指定測哪種激素，我們用該激素標(biāo)準(zhǔn)品來定性、定量。
2、為什么所有激素指標(biāo)不能一起測，要同類測或者一個個測？
植物激素不同與糖、蛋白質(zhì)含量高，在植株內(nèi)激素含量極低的，因此要精確決定定量，前處理是至關(guān)重要的步驟之一，不同的激素指標(biāo)前處理方法不同，特別是一些含量pg級別的激素，必須經(jīng)過特殊的前處理，并排除基質(zhì)效應(yīng)的影響，才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
3、植物激素為什么會出現(xiàn)檢測結(jié)果或預(yù)期不符合或者相差很大，或者甚至相反？應(yīng)該如何避免？
1）、取樣的關(guān)鍵性：植物激素在植物樣本中含量極低，植物不同部位的細(xì)胞中激素本身變化很大，樣本均一性難控制；所以盡量采集相同處理的相同部位；同時采集過程中，相當(dāng)于對植物 進(jìn)行了傷害脅迫，會引起植物應(yīng)激反應(yīng)；
2）、存儲條件的影響：植物激素處于不斷的轉(zhuǎn)移與代謝變化中，樣本存儲時間過久，反復(fù)凍融、運(yùn)輸干冰不夠等，也會對結(jié)果產(chǎn)生影響。
因此、建議大家要采集要取樣時間一致，取樣生理部位統(tǒng)一、取樣后立即用液氮速凍，然后進(jìn)行超低溫保存。運(yùn)輸過程使用充足的干冰運(yùn)輸。
植物抗性（plant resistance）是指植物適應(yīng)逆境的能力。植物周圍的環(huán)境（氣候、土壤、水分營養(yǎng)供應(yīng)等因素）是經(jīng)常變化的，往往構(gòu)成干旱、過濕、淹水、鹽堿、高溫、低溫、霜凍，大氣、水和土壤污染等傷害，這些不利條件統(tǒng)稱逆境或環(huán)境脅迫。
植物抗性可分為三種形式，即避性、御性和耐性；研究抗性相關(guān)指標(biāo)的各種生理指標(biāo)的意義是什么呢？
我們對常測抗性指標(biāo)意義做了歸納：
超氧化物歧化酶（SOD）（EC 1.15.1.1）在動植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞體內(nèi)廣泛存在，其具有抗衰老、提高機(jī)體對多種疾病的抵抗力，能增強(qiáng)機(jī)體對外界環(huán)境的適應(yīng)力，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
過氧化物酶（POD，EC 1.11.1.7）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是普遍存在的一種重要的氧化還原酶，其活性高低與抗性密切相關(guān)
過氧化氫酶(CAT，EC 1.11.1.6)普遍存在于植物動物組織中，其活性與生物體的代謝強(qiáng)度及抗寒、抗病能力有一定關(guān)系。
丙二醛（MDA）是由于生物體官衰老或在逆境條件下受傷害，其組織或器官膜脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)而產(chǎn)生的。它的含量與生物體衰老及逆境傷害有密切關(guān)系。
游離脯氨酸（PRO）含量在一定程度上反映了植物的抗逆性，抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸。因此測定脯氨酸含量可以作為抗旱育種的生理指標(biāo)。另外，由于脯氨酸親水性極強(qiáng)，能穩(wěn)定原生質(zhì)膠體及組織內(nèi)的代謝過程，因而能降低凝固點(diǎn)，有防止細(xì)胞脫水的作用。在低溫條件下，植物組織中脯氨酸含量增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作為抗寒育種的生理指標(biāo)。
可溶性蛋白：指可以以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑的蛋白。通常在植物生理，微生物、食品加工等實(shí)驗(yàn)中作為重要指標(biāo)。如可溶性蛋白是植物抗寒性的重要指標(biāo)之一?？扇苄缘鞍资侵匾臐B透調(diào)節(jié)物質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)，他們的增加和積累能提高細(xì)胞的保水能力，對細(xì)胞的生命物質(zhì)及生物膜起到保護(hù)作用，因此經(jīng)常用作篩選抗性的指標(biāo)之一。
可溶性糖：是植物內(nèi)一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，水分脅迫、顏脅迫，冷脅迫等不良環(huán)境都會使植物內(nèi)的可溶性糖含量發(fā)生顯著變化。
目的
為生化指標(biāo)檢測中土壤酶活及元素的采集、儲存等操作提供參考。
適用范圍
適用于土壤酶活及元素的采集及儲存。
操作流程：
1. 樣本收集
2. 野外大田或者實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，按照客戶研究需要取一定量的鮮土，然后冷凍保存，若僅測酶活與土壤元素，可以先進(jìn)行風(fēng)干。
3. 風(fēng)干樣品：從野外采回的土壤樣品要及時放在樣品盤上，攤成薄薄的一層置于干凈整潔的室內(nèi)通風(fēng)自然風(fēng)干，嚴(yán)禁暴曬。
4. 取風(fēng)干土壤若干質(zhì)量，讓后用木棍或塑料木棍碾壓，并將植物殘體、石塊等侵入體和新生體剔除干凈，細(xì)小已斷的植物須根，可用靜電吸附的方法清除。壓碎的土壤全部通過2 mm孔徑篩，然后過40目篩。
樣本量要求
需過篩后土壤量≥5g/指標(biāo)。
儲存及運(yùn)輸
風(fēng)干土壤常溫運(yùn)輸，無需干冰。
鮮土樣本可以用冰袋運(yùn)輸或干冰，
【注】：新鮮土壤需要風(fēng)干、過篩。代測交期相應(yīng)順延！
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