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線粒體-3-磷酸甘油脫氫酶(mt-GPD)活性試劑盒

貨號:G0917F
規(guī)格:
檢測方法:可見分光光度法
檢測儀器:可見分光光度計
促銷價:
數(shù)量:
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產(chǎn)品介紹

   線粒體-3-磷酸甘油脫氫酶(mt-GPD)存在于線粒體中,在3-磷酸甘油途徑中起重要作用,催化底物3-磷酸甘油生成磷酸二羥丙酮,同時生成的電子和氫進入呼吸鏈參與氧化磷酸化;在電子傳遞體(PMS)存在下,使噻唑藍(MTT)還原生成藍色產(chǎn)物,通過檢測該藍色產(chǎn)物在550nm處的增加速率,即可得出mt-GPD活性大小。

所需實驗用品

      可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、天平、低溫離心機

常見問題

1、試劑盒的運輸
    生化試劑盒一般采用冰袋運輸;運輸中冰袋已融化并不會影響其質(zhì)量,請放心使用。
2、試劑盒的保存:
    收到后,請在預實驗前及時確認各組分量是否與說明書標注的一致,若有疑問請及時與我們技術(shù)聯(lián)系(聯(lián)系方式見說明書右下方),拆開包裝后,請按照每個試劑的保存溫度保存。
3、試劑盒有效期
     試劑盒大標簽上顯示試劑盒有效期,一般是3個月或6個月(具體以大標簽為準)。粉體試劑加溶液后的保存周期,可參照說明書中“備注”一欄的說明(也可聯(lián)系說明書下方的技術(shù)支持咨詢確認)。
4、預實驗五步法
    強烈建議客戶選取2-3個預期結(jié)果差別較大的樣本做預測定。
    目的:了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
    第一步:將試劑盒內(nèi)的紙質(zhì)版說明書通讀一遍,核查試劑數(shù)量、狀態(tài)(粉體、液體)及各組份的量與說明書是否一致,若無異常則按照規(guī)定溫度存放。
    第二步:臨用前取出試劑,溶解或者恢復至室溫,以待使用。
    第三步:選擇差異大的2-3個樣本進行研磨提取,取上清液備用。
    第四步:根據(jù)說明書操作步驟進行預實驗。
    第五步:待預實驗確定好樣本檢測濃度、調(diào)整情況后,再批量進行正式實驗。
5、分光法(F)與微板法(W)的區(qū)別
    F:指分光法;W:指微板法;
    分光法是指使用紫外可見分光光度計或可見分光光度計檢測,分光法試劑盒(貨號中帶“F”),需要使用石英或玻璃比色皿;其規(guī)格是:光徑:1cm,容積:1mL, 狹縫寬:3mm
    微板法指使用全波段連續(xù)酶標儀檢測。微板法試劑盒(貨號中帶“W”),需要使用96孔酶標板或UV板,其規(guī)格是:U型底或平底、最大孔容量300μL
6、普通酶標板與UV板的區(qū)別?
    使用酶標儀檢測時,如果波長大于等于340nm,使用普通的96孔板;但是波長小于340nm時,需要使用UV板(紫外酶標板);UV板(PS聚苯乙稀石英底)價格比較貴,但是可以清洗,重復使用。一般建議重復使用3-5次;
    最終測定的反應液為有機試劑時(乙酸乙酯、四氫呋喃等有機試劑),避免使用聚苯乙稀材質(zhì)的96孔板。
7、分光法與微板法試劑盒能混用嗎?
    不可以。兩者原理幾乎一樣,但因反應體系、樣本用量、試劑濃度、儀器和耗材都不同,并且混用后結(jié)果的準確性不能保證,不建議混用與任意改變體系。
8、市面上見到的50T/48S;100T/96S;120T/100S是什么意思?
     T:指測試(Test)次數(shù);在實驗室中,這通常指的是反應孔;每個反應孔可以是一個實驗樣本,或者對照;并不代表測的樣本個數(shù)。50T是50個反應孔,不一定代表測50個樣本; 100T、120T也是如此;
S:指可以測試的樣本(Sample)個數(shù);48樣、96樣:指可以檢測48個樣本、96個樣本(不含重復)即得到48個、96個數(shù)據(jù)結(jié)果
9、官網(wǎng)上試劑盒規(guī)格標注的“48樣”、“96樣”是什么意思呢?
    “48樣”、“96樣”是試劑盒規(guī)格,我們定義了試劑盒可以測多少樣,對于試劑盒需要的試劑量都給足的;一般會給到超出需用量的10-20%。
    48樣、96樣:指可以檢測48個樣本、96個樣本(不含重復)即得到48個、96個最終的數(shù)據(jù)結(jié)果。格銳思生物的試劑盒48樣可以測不少于50個樣本;96樣指可以測定不少于100個樣本。
10、標準曲線是否需要重新做?
    一般不建議重新做標準曲線,標準曲線繪制會損耗試劑量,不夠測到試劑盒規(guī)格的樣本數(shù)量,另外我們的標準曲線是可以溯源,保證標曲的客觀、真實、科學嚴謹,可以直接使用。
    a、格銳思針對需要標曲曲線的指標,給了標準曲線方程,同時給了標準曲線圖,以證實我們的標曲是客觀做出來的,不是理論推導的。
    b、格銳思同時給了標準曲線繪制的實驗的步驟,客戶對標曲有疑問的話,可以按照我們步驟,重新做標曲。
    c、格銳思根據(jù)標曲推導出最終的計算公式,客戶只需要測出吸光值差值與樣本重量就可以帶入計算。
11、什么是冰浴勻漿?
    (1)使用研缽勻漿:將研缽置于冰盒上勻漿即冰浴勻漿。稱取樣本置于研缽中,研缽和提取液提前預冷或?qū)⒀欣徶糜谒楸?、冰盒上,加入一半量的提取液研磨均勻,轉(zhuǎn)移至離心管中,再向研缽中加入另一半量的提取液涮洗研缽,轉(zhuǎn)移至同一離心管中合并;
    (2)使用勻漿機進行勻漿:先把研磨模塊提前放到-20℃預冷;然后將稱好的組織放入離心管中,加入適量預冷的提取液、鋼珠,按照勻漿機要求設定參數(shù),進行研磨,動物植物組織都可以,對于纖維含量高,難磨樣本可以提高赫茲和延長時間。或者多次反復研磨
    (3)使用液氮研磨后勻漿:樣本液氮研磨成粉后,加入提取液再次按照(1)、(2)的方式研磨,或者放入超聲波清洗儀300W超聲5min,超聲全程溫度不得超過10℃。
12、樣本的保存
    測常規(guī)指標,樣本保存在-80℃下,一年以上都可以測;保存在-40℃下,半年之內(nèi)都可以測;保存在-20℃下,三個月都沒問題。

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