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結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒(可見(jiàn)顯色法)

貨號(hào):G0538W
規(guī)格:
檢測(cè)方法:微板法(內(nèi)送酶標(biāo)板)
檢測(cè)儀器:酶標(biāo)儀
促銷價(jià):
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產(chǎn)品介紹

         結(jié)合態(tài)淀粉合成酶 GBSSEC 2.4.1.21以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。GBSS 催化 ADPG 與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成 ADP,通過(guò)反應(yīng)體系中添加的酶促混合物依次催化 NADP +還原為 NADPH,且 NADPH 生成量與前一步反應(yīng)中 ADP 生成量呈正比。

        傳統(tǒng)方法是通過(guò)檢測(cè) 340nm 下 NADPH 增加量,但該法檢測(cè)靈敏度低,且易受到色素(如綠色葉片)干擾,本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單,靈敏,快速的測(cè)定方法:該酶促過(guò)程產(chǎn)生的 NADPH 與特異的顯色探針?lè)磻?yīng)生成有色物質(zhì),通過(guò)在 450nm 下檢測(cè)該有色物質(zhì)的增加速率,進(jìn)而計(jì)算出 GBSS 酶活性大小。

所需實(shí)驗(yàn)用品

      酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、天平、低溫離心機(jī)

常見(jiàn)問(wèn)題

1、試劑盒的運(yùn)輸
    生化試劑盒一般采用冰袋運(yùn)輸;運(yùn)輸中冰袋已融化并不會(huì)影響其質(zhì)量,請(qǐng)放心使用。
2、試劑盒的保存:
    收到后,請(qǐng)?jiān)陬A(yù)實(shí)驗(yàn)前及時(shí)確認(rèn)各組分量是否與說(shuō)明書標(biāo)注的一致,若有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)與我們技術(shù)聯(lián)系(聯(lián)系方式見(jiàn)說(shuō)明書右下方),拆開(kāi)包裝后,請(qǐng)按照每個(gè)試劑的保存溫度保存。
3、試劑盒有效期
     試劑盒大標(biāo)簽上顯示試劑盒有效期,一般是3個(gè)月或6個(gè)月(具體以大標(biāo)簽為準(zhǔn))。粉體試劑加溶液后的保存周期,可參照說(shuō)明書中“備注”一欄的說(shuō)明(也可聯(lián)系說(shuō)明書下方的技術(shù)支持咨詢確認(rèn))。
4、預(yù)實(shí)驗(yàn)五步法
    強(qiáng)烈建議客戶選取2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
    目的:了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
    第一步:將試劑盒內(nèi)的紙質(zhì)版說(shuō)明書通讀一遍,核查試劑數(shù)量、狀態(tài)(粉體、液體)及各組份的量與說(shuō)明書是否一致,若無(wú)異常則按照規(guī)定溫度存放。
    第二步:臨用前取出試劑,溶解或者恢復(fù)至室溫,以待使用。
    第三步:選擇差異大的2-3個(gè)樣本進(jìn)行研磨提取,取上清液備用。
    第四步:根據(jù)說(shuō)明書操作步驟進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。
    第五步:待預(yù)實(shí)驗(yàn)確定好樣本檢測(cè)濃度、調(diào)整情況后,再批量進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。
5、分光法(F)與微板法(W)的區(qū)別
    F:指分光法;W:指微板法;
    分光法是指使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)或可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè),分光法試劑盒(貨號(hào)中帶“F”),需要使用石英或玻璃比色皿;其規(guī)格是:光徑:1cm,容積:1mL, 狹縫寬:3mm
    微板法指使用全波段連續(xù)酶標(biāo)儀檢測(cè)。微板法試劑盒(貨號(hào)中帶“W”),需要使用96孔酶標(biāo)板或UV板,其規(guī)格是:U型底或平底、最大孔容量300μL
6、普通酶標(biāo)板與UV板的區(qū)別?
    使用酶標(biāo)儀檢測(cè)時(shí),如果波長(zhǎng)大于等于340nm,使用普通的96孔板;但是波長(zhǎng)小于340nm時(shí),需要使用UV板(紫外酶標(biāo)板);UV板(PS聚苯乙稀石英底)價(jià)格比較貴,但是可以清洗,重復(fù)使用。一般建議重復(fù)使用3-5次;
    最終測(cè)定的反應(yīng)液為有機(jī)試劑時(shí)(乙酸乙酯、四氫呋喃等有機(jī)試劑),避免使用聚苯乙稀材質(zhì)的96孔板。
7、分光法與微板法試劑盒能混用嗎?
    不可以。兩者原理幾乎一樣,但因反應(yīng)體系、樣本用量、試劑濃度、儀器和耗材都不同,并且混用后結(jié)果的準(zhǔn)確性不能保證,不建議混用與任意改變體系。
8、市面上見(jiàn)到的50T/48S;100T/96S;120T/100S是什么意思?
     T:指測(cè)試(Test)次數(shù);在實(shí)驗(yàn)室中,這通常指的是反應(yīng)孔;每個(gè)反應(yīng)孔可以是一個(gè)實(shí)驗(yàn)樣本,或者對(duì)照;并不代表測(cè)的樣本個(gè)數(shù)。50T是50個(gè)反應(yīng)孔,不一定代表測(cè)50個(gè)樣本; 100T、120T也是如此;
S:指可以測(cè)試的樣本(Sample)個(gè)數(shù);48樣、96樣:指可以檢測(cè)48個(gè)樣本、96個(gè)樣本(不含重復(fù))即得到48個(gè)、96個(gè)數(shù)據(jù)結(jié)果
9、官網(wǎng)上試劑盒規(guī)格標(biāo)注的“48樣”、“96樣”是什么意思呢?
    “48樣”、“96樣”是試劑盒規(guī)格,我們定義了試劑盒可以測(cè)多少樣,對(duì)于試劑盒需要的試劑量都給足的;一般會(huì)給到超出需用量的10-20%。
    48樣、96樣:指可以檢測(cè)48個(gè)樣本、96個(gè)樣本(不含重復(fù))即得到48個(gè)、96個(gè)最終的數(shù)據(jù)結(jié)果。格銳思生物的試劑盒48樣可以測(cè)不少于50個(gè)樣本;96樣指可以測(cè)定不少于100個(gè)樣本。
10、標(biāo)準(zhǔn)曲線是否需要重新做?
    一般不建議重新做標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制會(huì)損耗試劑量,不夠測(cè)到試劑盒規(guī)格的樣本數(shù)量,另外我們的標(biāo)準(zhǔn)曲線是可以溯源,保證標(biāo)曲的客觀、真實(shí)、科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),可以直接使用。
    a、格銳思針對(duì)需要標(biāo)曲曲線的指標(biāo),給了標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,同時(shí)給了標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,以證實(shí)我們的標(biāo)曲是客觀做出來(lái)的,不是理論推導(dǎo)的。
    b、格銳思同時(shí)給了標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的實(shí)驗(yàn)的步驟,客戶對(duì)標(biāo)曲有疑問(wèn)的話,可以按照我們步驟,重新做標(biāo)曲。
    c、格銳思根據(jù)標(biāo)曲推導(dǎo)出最終的計(jì)算公式,客戶只需要測(cè)出吸光值差值與樣本重量就可以帶入計(jì)算。
11、什么是冰浴勻漿?
    (1)使用研缽勻漿:將研缽置于冰盒上勻漿即冰浴勻漿。稱取樣本置于研缽中,研缽和提取液提前預(yù)冷或?qū)⒀欣徶糜谒楸?、冰盒上,加入一半量的提取液研磨均勻,轉(zhuǎn)移至離心管中,再向研缽中加入另一半量的提取液涮洗研缽,轉(zhuǎn)移至同一離心管中合并;
    (2)使用勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿:先把研磨模塊提前放到-20℃預(yù)冷;然后將稱好的組織放入離心管中,加入適量預(yù)冷的提取液、鋼珠,按照勻漿機(jī)要求設(shè)定參數(shù),進(jìn)行研磨,動(dòng)物植物組織都可以,對(duì)于纖維含量高,難磨樣本可以提高赫茲和延長(zhǎng)時(shí)間?;蛘叨啻畏磸?fù)研磨
    (3)使用液氮研磨后勻漿:樣本液氮研磨成粉后,加入提取液再次按照(1)、(2)的方式研磨,或者放入超聲波清洗儀300W超聲5min,超聲全程溫度不得超過(guò)10℃。
12、樣本的保存
    測(cè)常規(guī)指標(biāo),樣本保存在-80℃下,一年以上都可以測(cè);保存在-40℃下,半年之內(nèi)都可以測(cè);保存在-20℃下,三個(gè)月都沒(méi)問(wèn)題。

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