膽固醇酯酶(CHER)和膽固醇氧化酶(CHOD)經(jīng)化學(xué)修飾后,與葡萄糖硫酸鈉、硫化環(huán)狀糊精復(fù)合物并用,使對 LDL、VLDL、乳糜微粒的酶反應(yīng)性降低,只選擇性與 HDL-膽固醇發(fā)生作用。
基于此原理,在第一步反應(yīng)中使 LDL、VLDL、乳糜微粒與葡萄糖硫酸鈉、硫化環(huán)狀糊精復(fù)合物結(jié)合,在第二步反應(yīng)中利用化學(xué)修飾的 CHER、CHOD,無須分離其他脂蛋白直接測定 HDL-膽固醇。即利用化學(xué)修飾的 CHER 催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC),F(xiàn)C 在 CHOD 作用下被氧化生成 4-膽甾烯酮和 H2O2;接著與 4-氨基氨替吡啉等反應(yīng)生成紅色醌類化合物,其在 546nm 處有特征吸收峰,通過檢測 546nm 處吸光值即可得出 HDL-C 含量。